Vortexing haitanyoa RNA yako ili kuifanya isiweze kutumika ikiwa unafanya RT bila mpangilio maalum - ikiwa tu ungependa kuunda mRNA ndefu. Usaidizi wa teknolojia ya Invitrogen ni sahihi pia. Chloroform ni nzito kuliko Trizol na itazama hadi chini ya mrija.
Je, ni salama kwa vortex RNA?
Usipeperushe sampuli za Trizol lysates au RNA ili kuepuka kunyoa nywele. Baada ya uchimbaji, weka sampuli za RNA kwenye barafu wakati wote. Itifaki hii imeundwa kwa ajili ya sampuli zilizowekwa 1mL ya Trizol katika mirija ya 1.5 au 2mL.
Je, unaweza kupasha joto RNA?
Kwa hivyo, epuka halijoto ya juu ( zaidi ya +65°C) kwa kuwa hizi huathiri uadilifu wa RNA. Badala yake, ili kuyeyusha miundo ya pili, pasha joto RNA hadi +65°C kwa dakika 15 kukiwa na vibafa vya kugeuza.
Je, unasimamisha vipi pellets za RNA?
simamisha pellet yako kwa maji moto (40-50 deg. celc). weka kwenye joto la 45 ° C kwa dakika 10. ziweke katika +4 kwa saa 4-6.
Je, unapataje RNA?
A.
Baada ya mkusanyiko wa chumvi kurekebishwa, RNA inaweza kuwashwa na kuongeza ujazo 2.5 wa ethanoli au ujazo 1 wa isopropanoli na kuchanganywa vizuri, ikifuatiwa na kutulia kwa angalau dakika 15 kwa -20° C.
