Ufuatao ni muhtasari wa hatua tofauti za itifaki ya madoa isiyo ya moja kwa moja ya immunofluorescence
- Upangaji wa Majaribio na Maandalizi ya Sampuli. …
- Sampuli ya Urekebishaji. …
- Uwezeshaji wa Kiini. …
- Kuzuia. …
- Uchambuzi wa Kingamwili Msingi. …
- Utegaji wa Kingamwili wa Pili. …
- Kukabiliana na Kupanda.
Je, unafanyaje immunofluorescence?
Hatua zote za incubation hufanyika kwenye halijoto ya kawaida
- Osha seli mara mbili na utumie kibano kuweka kwa uangalifu kifuniko chenye seli zilizoinuliwa kwenye chemba yenye unyevunyevu.
- Rekebisha kwa 4% formaldehyde kwa dakika 10 na osha 3 ×.
- Permeabilize kwa 0.1 % TX-100/PBS kwa dakika 15–20 na kuosha 3 ×.
Unatumia vipi kingamwili kwenye seli?
Itifaki ya Immunofluorescence kwa seli zinazoshikamana
- Mbegu 1–1.5 x104 seli kwa kila kisima cha slaidi ya chemba 4 katika mililita 500 za media media. Ingiza kwa 37°C kwa 5% CO2.
- saa 32–36 baada ya seli kuota, ondoa kiungo cha uundaji seli na suuza seli mara 3 kwa kutumia 500 µL ya 1X PBS.
Mfano wa immunofluorescence ni upi?
Kwa mfano, mtafiti anaweza kuunda kingamwili za msingi katika mbuzi ambazo hutambua antijeni kadhaa, na kisha kutumia kingamwili za pili za sungura zilizounganishwa kwa rangi ambazo hutambua eneo la kingamwili la mbuzi ( kingamwili za sungura dhidi ya mbuzi).
Je, matumizi ya rangi ya immunofluorescence ni nini?
Uchafuzi wa Immunofluorescence (IF) ni mbinu inayotumika sana katika utafiti wa kibiolojia na uchunguzi wa kimatibabu IF hutumia kingamwili zenye lebo ya florini ili kugundua antijeni lengwa. Ikifuatiwa na kupiga picha, ni mbinu ya moja kwa moja kwani unaweza kuona kitu.